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400-0588-030

Xeno-Free人類間充質干細胞培養基

市場價:¥2096.00

商城售價:1886.00

所得積分:1886

貨 號:AC-1001003

品 牌:埃澤思(Applied Cell)

規格:450ml+50ml

存儲條件:4°C

供貨時間:現貨

數 量:
庫存9999件
  • 產品詳情

產品基本信息

產品名稱

Applied CellTMXeno-Free人類間充質干細胞培養基

貨    號

AC-1001003

規    格

基礎培養基450mL添加劑50mL

試用裝規格

基礎培養基36mL添加劑4mL

運輸保存條件

基礎培養基2-8℃,添加劑-20-80℃;混合后2-8

使用范圍

人類骨髓、脂肪臍帶等組織來源的間充質干細胞

原代分離、擴增與傳代培養

保質期

12個月

產品簡介

Xeno-Free人類間充質干細胞培養基是埃澤思生物(Applied CellTM)自主研發的一款無外源動物成分的人類間充質干細胞培養基。可應用于人類骨髓、脂肪臍帶等組織來源的間充質干細胞的原代分離、擴增與傳代培養,并保持其多向分化潛能。GMP級別生產車間,嚴格執行cGMP操作標準,各項指標優于行業標準。

Xeno-Free人類間充質干細胞培養基主要成分:氨基酸,維生素、無機鹽、白蛋白,轉鐵蛋白、胰島素、微量元素,細胞因子等。

產品特性

l  無外源動物蛋白成分,大大降低各類病毒、霉菌和支原體等的污染風險。

l  全程無血清生產,極大降低批次間差異,避免實驗條件的重復摸索。

l  培養載體無需包被,直接培養。

l  擴增效率高,24h左右增殖翻倍,節省培養時間。

組分

規格

數量

運輸

Human Mesenchymal Stem Cell Basal Medium

人類間充質干細胞基礎培養基

450mL

1

冰袋

Human Mesenchymal Stem Cell Supplement

人類間充質干細胞添加劑

50mL

1

干冰

產品內容

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Serum-Free細胞凍存液Applied CellTM: Cat. no.AC-1001005/1001006

人類臍帶間充質干細胞Applied CellTM: Cat. no.AC-2001003

人類脂肪間充質干細胞Applied CellTM: Cat. no.AC-2001004

                       

實驗準備

人類間充質干細胞培養基配制

1) 37快速解凍人類間充質干細胞培養基添加劑,快速溶解時不易破壞添加劑中營養物質,時間大致為10min。待添加劑融化后緩慢搖勻,分裝或直接按比例添加到基礎培養基中,分裝后添加劑立即儲存于-20-80℃,避免反復凍融

2)將添加劑以10%比例加入到人類間充質干細胞基礎培養基混勻,即為人類間充質干細胞培養基AC-1001003人類間充質干細胞培養基AC-1001003可在2-8 穩定儲存2-3周,不建議使用已配制超過3周的培養基。

3)人類間充質干細胞培養基AC-1001003可直接應用于人類骨髓、脂肪臍帶等組織來源的間充質干細胞的原代分離、擴增與傳代培養,具體操作方法及其他相關技術資料請參考埃澤思生物官網。

操作方法(以下步驟皆應在無菌條件下操作)

hMSC細胞復蘇(10cm dish)

1.  從液氮中取出凍存的hMSC細胞,迅速將凍存管放入37℃水浴快速融解。

2.     在生物安全柜或超凈臺中,將解凍后的細胞懸液緩慢加入5 mL預溫的人類間充質干細胞培養基(AC-1001003

3.     300g 離心3 min,吸掉上清,加入10ml人類間充質干細胞培養基(AC-1001003重懸細胞。

4.     將細胞均勻鋪到培養皿中,水平十字振動培養皿使細胞均勻分布,5% CO237℃恒溫細胞培養箱中培養24小時后觀察細胞狀態。

5.     2天吸掉原來培養基,加入新鮮的人類間充質干細胞培養基(AC-1001003繼續培養,每2天更換培養液。

hMSC細胞傳代培養

1.     在顯微鏡下觀察細胞,當細胞融合度達到90%,即可傳代。

2.     在超凈臺/安全柜中,吸走培養瓶中舊的人類間充質干細胞培養基(AC-1001003,加入PBS溶液洗一次,加入人類間充質干細胞消化液(AC-1001024/1001025使之完全覆蓋皿/瓶底。

3.     室溫孵育5-6分鐘或37℃孵育3-5分鐘,顯微鏡下觀察到大部分克隆邊緣開始脫離皿/瓶底,克隆內部細胞間出現間隙,停止消化。

4.     加入與消化液2倍體積的人類間充質干細胞培養基(AC-1001003中和消化,用移液器輕輕吹打瓶壁上未完全脫離的細胞,并輕輕吹打混勻,使細胞完全分散。

5.     將細胞懸液轉移到15 mL離心管中,1000 rpm離心3 min

6.     棄上清,加入人類間充質干細胞培養基(AC-1001003,重懸細胞,13-14傳代,均勻鋪在培養皿/瓶中,置于37℃5%CO2 條件下培養。

注意:細胞傳代所需的時間:2-4天。5代及之前的細胞,生長速度較快。5代以后的細胞,生長速度稍緩。

hMSC細胞凍存

1.  細胞達到80-90%匯合度, 吸走舊的人類間充質干細胞培養基(AC-1001003,并且加入PBS溶液清洗。

2.     加入人類間充質干細胞消化液AC-1001024/1001025使之完全覆蓋皿/瓶底,室溫孵育5-8分鐘或37℃孵育3-5分鐘,顯微鏡下觀察到大部分克隆邊緣開始脫離皿/瓶底,克隆內部細胞間出現間隙,停止消化。

3.     加入與消化液2倍體積的人類間充質干細胞培養基(AC-1001003中和消化,用移液器輕輕吹打瓶壁上未完全脫離的細胞,并輕輕吹打混勻,使細胞完全分散,將細胞懸液轉移到15 mL離心管中,1000 rpm離心3 min,吸掉上清。

4.     緩慢加入適量Serum-free細胞凍存液AC-1001005/1001006,調整細胞密度在1×106 cells/mL左右,每支凍存管分裝1.5-2ml

5.     輕輕地重懸細胞,將重懸均勻的細胞按等份加入到無菌凍存管(需提前做好標記)中,旋緊凍存管蓋

6.     直接放入-80℃,一天或兩天后放入液氮中長期保存。

質量控制

 


指  標


澄清

顏色


培養基為紅色,添加劑為橙黃色

pH


7.0-7.4

滲透壓 mOsmol/kg


280-320

EU/ml

培養基


<0.25

添加劑


<0.25

微生物限度


無菌試驗合格,0.1μm過濾

細胞生長試驗

形態


細胞為梭形,呈指紋狀或旋渦狀生長

細胞生長試驗


合格


商家信息
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