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雅酶 細胞核/漿蛋白抽提試劑盒(您所在地區可能無法購買,詳情請咨詢:400-0588-030)

市場價:¥598.00

商城售價:598.00

所得積分:598

貨 號:PC306

品 牌:雅酶(EpiZyme)

包裝: 50次

單位:

供貨時間:現貨

數 量:
庫存9987件
  • 產品詳情

細胞核/漿蛋白抽提試劑盒

Nuclear and Cytoplasmic Extraction Kit

本產品冰袋運輸;保存于4其中 蛋白酶抑制劑混合液 需保存于-20保質期12個月

 

貨號規格

PC306:  50


 產品內容

組分名稱

體積

抽提試劑A

50 ml

抽提試劑B

3 ml

抽提試劑C

25 ml

蛋白酶抑制劑混合液

750 μl

 

產品簡介

細胞核/漿蛋白抽提試劑盒能夠簡單、快速的提取來源于哺乳動物細胞及組織的細胞核和細胞漿蛋白,所提取蛋白保持生物學活性。本試劑盒首先通過細胞漿蛋白抽提試劑裂解細胞膜,釋放細胞漿蛋白,然后通過離心得到細胞核沉淀。最后通過細胞核蛋白抽提試劑抽提得到細胞核蛋白。抽提獲得的核蛋白及漿蛋白純度高,有效避免核/漿蛋白的交叉污染,可以用于Western Blot、Gel Shift、報告基因檢測以及酶活力測定等后續操作。

 

使用說明

細胞中胞漿、胞核蛋白的提取:

1. 請在蛋白抽提前取出 抽提試A  抽提試B 進行預冷;

2. 收集細胞,計數。離心去上清;

3. 1×107細胞中加入1 ml  抽提試A 在使用前2~3 min按照1:100加入 蛋白酶抑制劑混合液 ,渦旋5 s以充分混勻,冰上孵育20 min;

注意各種細胞的特性不同,需要根據不同細胞的特性調整 抽提試A 的用量,如果蛋白濃度小, 按比例減少 抽提試A 及后續 抽提試B 、 抽提試C 的用量。

4. 加入55 μl  抽提試B ,渦旋5 s以充分混勻,冰上孵育1 min;

5. 4℃ 14,000 g 離心15 min,收集上清盡量收集干凈上清液至新的離心管中,-20℃保存此提取液為胞漿蛋白

6. 向上步所得的沉淀中加入500 μl  抽提試C在使用前2~3 min按照1:100加入 蛋白酶抑制劑混合液 ,渦旋5 s以充分混勻,重懸沉淀,冰上孵育40 min,每隔10 min渦旋混勻一次,每次約15~30 s;

7. 4℃ 14,000 g離心15 min,收集上清(盡量收集干凈上清液)至新的離心管中,-20℃保存(此提取液為胞核蛋白)。

 

組織中胞漿、胞核蛋白的提取

1. 請在蛋白抽提前取出 抽提試A 和 抽提試B 進行預冷;

2. 稱組織重量,每100 mg組織中加入1 ml  抽提A 在使用前2~3 min按照1:100加入 蛋白酶抑制劑混合液 ,用勻漿器在冰上充分勻漿,放置在冰上孵育20 min;

注意各種組織的特性不同,需要根據不同組織調整 抽提試A 的用量,如果蛋白濃度小,按比例減少 抽提試A 及后續 抽提試B 、 抽提試C 的用量。

3. 加入55 μl  抽提試B ,渦旋5 s以充分混勻,放置在冰上孵育1 min;

4. 4℃ 14,000 g離心 15 min,收集上清(盡量收集干凈上清液)至新的離心管中,-20℃保存此提取液為胞漿蛋白

5. 向上步所得的沉淀中加入500 μl  抽提試C 在使用前2~3 min按照1:100加入 蛋白酶抑制劑混合液 ,渦旋5 s以充分混勻,重懸沉淀,冰上孵育40 min,每隔10 min渦旋混勻一次, 4℃ 14,000 g離心15 min,收集上清盡量收集干凈上清至新的離心管中,-20℃保存此提取液為胞核蛋白

 

注意事項

1. 如需提取磷酸化蛋白請在抽提試劑中加入 磷酸酶抑制劑混合液貨號:GRF102

2. 為防止蛋白降解,所有的操作盡量在冰上進行;

3. 可根據具體實驗情況調整試劑用量,保證各試劑使用比例為 抽提試A : 抽提試B : 抽提試C =100 : 5.5 : 50;

4. 可以采用更高的速度來離心;

5. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作;

6. 本產品僅限科研使用。


商家信息
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