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400-0588-030

雅酶 柱式動物組織/細胞總蛋白抽提試劑盒(含蛋白酶抑制抑混合物)(您所在地區可能無法購買,詳情請咨詢:400-0588-030)

市場價:¥658.00

商城售價:658.00

所得積分:658

貨 號:PC201plus

品 牌:雅酶(EpiZyme)

包裝: 50次

單位:

供貨時間:現貨

數 量:
庫存9987件
  • 產品詳情

柱式動物組織/細胞總蛋白抽提試劑盒

Column Tissue&Cell Protein Extraction Kit

本產品常溫運輸(蛋白酶抑制抑混合物需冰袋運輸;天然裂解液儲存于 4℃,蛋白酶抑制抑混合物儲存于-20,其它組分儲存于常溫保質期12個月。

 

貨號規格

PC201:    50次

PC201plus: 50次(含蛋白酶抑制抑混合物) 

 

產品內容

組分名稱

PC201

PC201plus

變性裂解液

25 ml

25 ml

天然裂解液

25 ml

25 ml

蛋白酶抑制劑混合物

500 μl

純化柱

50

50

集管

50

50

塑料研磨棒

4根

4根

 

產品特點

   操作簡單——1 min可以得到變性總蛋白;

   無蛋白丟——可打開DNA雙鏈,高效獲取與DNA結合的蛋白;

    小樣本量,高得率——最小可處理20 μl樣本與裂解液混合物,提取的蛋白溶液濃度可達2~8 mg/ml;

   用多種——含有兩種裂解液,既可用于提取變性蛋白質,也可提取天然蛋白質。

 

產品簡介

        本試劑盒創新性地采用過柱純化的方法,能夠快速、溫和、高效地裂解動物組織或細胞,有效提取總蛋白。試劑盒同時提供變性和天然兩種裂解液,用戶可根據下游實驗需求進行選擇。整個提取過程僅需要1~8 min,由于采用過柱純化技術,最小可處理20 μl樣本與裂解液混合物,最大可達500 μl,提取的蛋白溶液濃度可達2~8 mg/ml,并可有效避免蛋白丟失。

 

使用說明

A. 變性總蛋白提取

1. 將純化柱及接收管套管放在冰上預冷;

2. 樣品處理(PC201plus:取適當量的裂解液,在使用前數分鐘內按1:100加入蛋白酶抑制劑;PC201則不需要此步操作。)

    2a. 貼壁細胞:將預冷的PBS直接加入培養板,培養皿或培養瓶中清洗貼壁細胞,吸去上清。按照表格1中將相應體積的 變性裂解液 均勻地加入整個器皿表面,用移液器吹打幾次。

    2b. 懸浮細胞:低速離心收集細胞,在1.5 ml離心管中加入預冷的PBS,渦旋震蕩,3,000 rpm離心2~3 min清洗細胞。吸去上清,剩余與細胞體積相同體積的PBS。渦旋震蕩重懸細胞。加入表格1中相應體積的 變性裂解液 ,渦旋震蕩裂解細胞。

注意:部分未完全裂解的細胞不會影響后續蛋白提取效果。

    2c. 組織:將15~20 mg組織放置于純化柱上,用塑料研磨棒扭轉研磨50~60次,加入200 μl 變性裂解液,繼續研磨30~60次。如果組織樣本起始量較大或者較小,需按比例調整相應裂解液的用量。

注意:塑料研磨棒可以重復使用,用蒸餾水徹底沖洗干凈,用紙巾擦干。

3. 離心

     3a. 貼壁細胞或懸浮細胞:將裂解后的細胞轉移到預冷的純化柱套管中,14,000~16,000 rpm離心30 s取出。

     3b. 組織:蓋上純化柱蓋子室溫孵育1~2 min,14,000~16,000 rpm離心1~2 min取出。

4. 立刻將收集管放置于冰上,棄去純化柱,變性總蛋白提取完成。

 

B. 天然總蛋白提取

1.  將天然細胞裂解液,純化柱及接收管套管放在冰上預冷;

2. 樣品處理(PC201plus:取適當量的裂解液,在使用前數分鐘內按1:100加入蛋白酶抑制劑;PC201則不需要此步操作。)

    2a. 貼壁細胞:將預冷的PBS直接加入培養板,培養皿或培養瓶中清洗貼壁細胞,吸去上清。按照表格1中將相應體積的 天然裂解液 均勻地加入整個器皿表面,放置于冰上孵育3~5 min,用移液器吹打幾次。

    2b. 懸浮細胞:低速離心收集細胞,在1.5 ml離心管中加入預冷的PBS,渦旋震蕩,3,000 rpm離心2~3 min清洗細胞。吸去上清,剩余與細胞體積相同體積的PBS。渦旋震蕩重懸細胞。加入表格1中相應體積的 天然裂解液 ,渦旋震蕩裂解細胞15 s。將離心管放置于冰上3~5 min,然后渦旋震蕩10 s。

注意:①部分未完全裂解的細胞不會影響后續蛋白提取效果;

②加入裂解液后,如果細胞裂解物太過粘稠,無法用200~1,000 μl吸頭吹打,可將細胞裂解物直接倒入倒入純化柱中,進行后續操作。

    2c. 組織:將15~20 mg組織放置于純化柱上,用塑料研磨棒扭轉研磨50~60次,加入200 μl 天然裂解液,繼續研磨30~60次。如果起始量較大或者較小,需調整相應裂解液的用量比例。

注意:塑料研磨棒可以重復使用, 用蒸餾水徹底沖洗干凈,用紙巾擦干。

3. 離心

3a. 貼壁細胞或懸浮細胞:將裂解后的細胞轉移到預冷的純化柱套管中,14,000~16,000 rpm離心30 s取出。

3b. 組織:開蓋冰上孵育5 min,蓋上純化柱蓋子,4℃,14,000~16,000 rpm離心1~2 min取出。

4. 立刻將收集管放置于冰上,棄去純化柱,天然總蛋白蛋白提取完成。

 

注意事項

1. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作;

2. 本產品僅限科研使用。

細胞數量(×106

裂解液(μl

0.3

20

0.5

50

1

100

2

200

3

500


商家信息
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