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雅酶PC201 柱式動物組織/細胞總蛋白抽提試劑盒(您所在地區可能無法購買,詳情請咨詢:400-0588-030)

市場價:¥498.00

商城售價:498.00

所得積分:498

貨 號:PC201

品 牌:雅酶(EpiZyme)

包裝: 50次

單位:

供貨時間:現貨

數 量:
庫存9987件
  • 產品詳情

柱式動物組織/細胞總蛋白抽提試劑盒

Column Tissue&Cell Protein Extraction Kit  

本產品常溫運輸蛋白酶抑制混合液 需冰袋運輸);變性裂解液天然裂解液儲存于 4℃蛋白酶抑制混合液儲存于-20℃其它組分儲存于常溫保質期12個月

 

貨號規格

PC201plus     50次

PC201plus     50次含蛋白酶抑制劑混合液 

 

產品內容

321.jpg

產品特點

35.png操作簡單——最快1min即可得到變性總蛋白

35.png無蛋白丟——可打開DNA雙鏈高效獲取與DNA結合的蛋白

35.png小樣本量、高得率——最小可處理20μL樣本與裂解液混合物提取的蛋白溶液濃度可達2 ~ 8 mg/mL

35.png用多種——含有兩種裂解液既可用于提取變性蛋白質也可提取天然蛋白質

 

產品簡介

本試劑盒創新性地采用過柱純化的方法能夠快速溫和高效地裂解動物組織或細胞有效提取總蛋白試劑盒同時提供變性和天然兩種裂解液用戶可根據下游實驗需求進行選擇整個提取過程僅需要1~8min由于采用過柱純化技術最小可處理20μL樣本與裂解液混合物最大可達500μL提取的蛋白溶液濃度可達2~8mg/mL并可有效避免蛋白丟失所提蛋白可采用BCA法進行蛋白定量分析貨號ZJ101或ZJ102),但不宜使用Omni-Rapid?快速蛋白定量試劑盒ZJ103

 

使用說明

A. 提取變性總蛋白

1. 將純化柱及接收管套管放在冰上預冷

2. 樣品處理PC201plus取適當量的 變性裂解液 在使用前數分鐘將 蛋白酶抑制劑混合液 按1:100加入其中PC201則不需要此步操作

    2a. 貼壁細胞將預冷的PBS直接加入培養板培養皿或培養瓶中清洗貼壁細胞吸去上清按照附表文末中將相應體積的 變性裂解液 均勻地加入整個器皿表面用移液器吹打幾次

    2b. 懸浮細胞低速離心收集細胞在1.5 mL離心管中加入預冷的PBS渦旋震蕩3,000 rpm離心2 ~ 3 min清洗細胞。吸去多余上清,留下與細胞相同體積的PBS渦旋震蕩重懸細胞加入附表中相應體積的 變性裂解液 渦旋震蕩裂解細胞

注意:部分未完全裂解的細胞不會影響后續蛋白提取效果 

    2c. 組織將15 ~ 20 mg組織放置于純化柱上用塑料研磨棒扭轉研磨50 ~ 60次加入200 μL 變性裂解液 繼續研磨30 ~ 60次如果組織樣本起始量較大或者較小需按比例調整相應裂解液的用量。 注意塑料研磨棒可以重復使用,用蒸餾水徹底沖洗干凈,用紙巾擦干

3. 離心

3a. 貼壁細胞或懸浮細胞將裂解后的細胞轉移到預冷的純化柱套管中,14,000 ~ 16,000 rpm離心30s取出

3b. 組織蓋上純化柱蓋子室溫孵育1 ~ 2 min14,000 ~ 16,000 rpm離心1 ~ 2 min取出

4. 立刻將收集管放置于冰上棄去純化柱變性總蛋白提取完成


B. 提取天然總蛋白

1.  將天然細胞裂解液純化柱及接收管套管放在冰上預冷

2. 樣品處理PC201plus取適當量的天然裂解液在使用前數分鐘將蛋白酶抑制劑混合液 按1:100加入其中PC201則不需要此步操作

    2a. 貼壁細胞將預冷的PBS直接加入培養板培養皿或培養瓶中清洗貼壁細胞吸去上清按照附表中將相應體積的 天然裂解液 均勻地加入整個器皿表面放置于冰上孵育3~5min用移液器吹打幾次

    2b. 懸浮細胞低速離心收集細胞在1.5mL離心管中加入預冷的PBS渦旋震蕩3,000rpm離心2~3min清洗細胞吸去多余上清留下與細胞相同體積的PBS渦旋震蕩重懸細胞加入附表中相應體積的 天然裂解液 渦旋震蕩裂解細胞15s將離心管放置于冰上3~5min然后渦旋震蕩10s

注意①部分未完全裂解的細胞不會影響后續蛋白提取效果

②加入裂解液后如果細胞裂解物太過粘稠無法用200~1,000μL吸頭吹打可將細胞裂解物直接倒入倒入純化柱中進行后續操作

    2c. 組織將15~20mg組織放置于純化柱上用塑料研磨棒扭轉研磨50~60次加入200μL 天然裂解液 繼續研磨30~60次如果起始量較大或者較小需調整相應裂解液的用量比例 注意塑料研磨棒可以重復使用用蒸餾水徹底沖洗干凈,用紙巾擦干

3. 離心

3a. 貼壁細胞或懸浮細胞將裂解后的細胞轉移到預冷的純化柱套管中14,000~16,000rpm離心30s取出

3b. 組織開蓋冰上孵育5min蓋上純化柱蓋子4℃14,000~16,000rpm離心1~2min取出

4. 立刻將收集管放置于冰上棄去純化柱天然總蛋白蛋白提取完成


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注意事項

1. 為了您的安全和健康請穿實驗服并戴一次性手套操作

2. 本產品僅限科研使用

商家信息
愛生物自營

聯系愛生物:

郵箱 :[email protected]

電話 :400-0588-030

地址 :上海市閔行區立躍路2995號

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